Análisis de sustancias estrogénicas en tejido adiposoMarcador de exposición en cáncer de mama

Resumen

El presente trabajo de investigación se encuadra dentro de un estudio epidemiológico de tipo caso:control, de base hospitalaria, cuyo objetivo general es el análisis de posibles factores de influencia en la carcinogénesis mamaria. Entre estas variables destaca por su novedad y singularidad la medida de la carga hormonal estrogénica, entendida como la expresión cuantitativa de la acitvidad estrogénica atribuible a xenoestrógenos bioacumulados en el organismo humano. Los objetivos han sido 1) desarrollar una metodología analítica para la extracción de xenobióticos estrogénicos a partir de tejido adiposo con la obtención de un extracto susceptible de ser testado en ensayo biológico adecuado. 2) Definir el mejor test in vitro con células MCF-7, para emplear en la estimación de la carga estrogénica. 3) Cuantificar la actividad hormonal de los extractos de tejido adiposo y estimar la carga hormonal estrogénica inducida por los mismos 4) Analizar por CG/DCE los extractos de tejido adiposo. Se han explorado cuatro test, utilizando compuestos con actividad estrogénica (bisfenoles): a) estimación de la proliferación celular en el sistema MCF-7 (test E-SCREEN), b) medida de luminiscencia por la actividad de un enzima expresado en las células MCF7 transfectadas permanentemente (Test MVLN) c) la inducción de la síntesis y secreción de la proteína estrógeno dependiente pS2 d) la cuantificación del RNA mensajero específico para la síntesis de pS2. El bioensayo E-SCREEN ha sido de elección por sensibilidad, especificidad y amplitud de respuesta. Se demuestra la actividad hormonal estrogénica de los pesticidas organoclorados que son analizados en el tejido adiposo. Se desarrolla una metodología para extracción de xenoestrógenos de tejido adiposo y posterior ensayo biológico. La purificación de la muestra se realiza por HPLC preparativa. Se obtienen tres fracciones: una contien