Biomarcadores plasmáticos y alteraciones de la respuesta inmunitaria en la telangiectasia hemorrágica hereditaria (HHT)

Laburpena

La Telangiectasia Hemorrágica Hereditaria (HHT) también conocida como síndrome de Rendu-Osler-Weber es una enfermedad rara caracterizada por la presencia de paredes vasculares débiles que dan lugar a la aparición de malformaciones arteriovenosas (MAVs). Las MAVs se localizan en piel y mucosas dando lugar a la aparición de Telangiectasias y epistaxis y, en órganos internos pudiendo dar lugar a hemorragias que podrían tener consecuencias fatales para el paciente. El diagnóstico de HHT se realiza en base a los Criterios clínicos de Curaçao, basados en la sintomatología clínica clásica HHT y teniendo en cuenta si existe un componente hereditario. En más del 90 por ciento de los casos las mutaciones están localizadas en ENG o ACVRL1 dando lugar a la HHT1 y HHT2, respectivamente. En el 10 por ciento de los casos restantes la mutación puede localizarse en un locus del cromosoma 5, un locus del cromosoma 7 o bien en GDF2. Todos los genes identificados hasta la fecha, codifican proteínas pertenecientes al sistema de señalización de TGFbeta. El diagnóstico HHT viene confirmado mediante el diagnóstico genético, pero el desconocimiento de la mutación familiar puede dar lugar a un retraso del diagnóstico, de tal modo que un diagnóstico precoz alternativo al genético sería de gran utilidad. En consecuencia, uno de los primeros objetivos de la presente tesis fue establecer una fórmula diagnóstica mediante la valoración de los niveles de endoglina soluble (sEng) y angiopoietina-2 (Ang-2), que nos permite identificar a los individuos afectos de HHT1 o HHT2 con una elevada fiabilidad. La HHT es una displasia vascular pero en los últimos años son varios los estudios y publicaciones que sugieren que la HHT podría estar relacionada con una deficiencia en la respuesta inmunitaria. Se han reportado diversos procesos infecciosos tales como abscesos cerebrales, osteomielitis, espondilodiscitis y bacteremias entre otros. Las infecciones se presentan con una mayor incidencia en comparación con la población general y se caracterizan por su recurrencia. En un segundo módulo de la presente Tesis Doctoral se analizaron de forma retrospectiva las historias clínicas de la cohorte HHT española con el fin de recopilar los procesos infecciosos y los datos analíticos de hemogramas. En paralelo, se analizó los niveles de expresión génica mediante microarrays de ADN en macrófagos de pacientes HHT, células que expresan endoglina y ALK1. Con los parámetros de selección se obtuvieron 27 genes inducidos y 185 reprimidos, respecto a controles no HHT. El análisis de enriquecimiento funcional indica que la represión de genes en macrófagos de pacientes HHT afecta los procesos biológicos de la respuesta inmune. Estos resultados están en concordancia con una menor producción de citoquinas in vitro por parte de los macrófagos de pacientes HHT. Para profundizar en el estudio de la respuesta inmunitaria en HHT, se generó un ratón deficiente en endoglina en macrófagos. Este modelo presenta un fenotipo inmunodeprimido caracterizado por la aparición de infecciones espontáneas causadas por bacterias oportunistas y, presenta una deficiente fagocitosis por parte de los macrófagos peritoneales. La evaluación de la supervivencia a un choque endotóxico y el reclutamiento de leucocitos tras la inducción de una peritonitis indican que la expresión de endoglina en el macrófago modula la iniciación de la respuesta inmunitaria. Tras la evaluación de algunos genes diana de TGFbeta en los macrófagos peritoneales, postulamos que endoglina y ALK1 modulan el sistema de señalización de TGFbeta en monocitos en diferenciación y macrófagos maduros. De este modo, la haploinsuficiencia en endoglina y ALK1 dará lugar a una disfunción de la respuesta inmune, que sería la causa subyacente a la mayor incidencia de enfermedades infecciosas reportadas en la literatura y también descritas en la presente tesis.