Purificación de una superóxido dismutasa excretada por parásitos del género leishmania (l. Infantum, l. Amazonensis, l. Peruviana y l. Braziliensis) y su uso para el diagnóstico de la leishmaniasis

Resumen

La leishmaniasis es una enfermedad infectiva protozoaria ocasionada por parásitos del genero Leishmania existiendo más de 20 especies patógenas para el hombre. La Organización Mundial de la Salud (OMS) en el 2010 reconoció que la leishmaniasis sigue todavía siendo una de las enfermedades tropicales más olvidadas y valoró que es endémica en 98 países, la mayoría en vía de desarrollo. Según las estimaciones de la OMS hay más de 12 millones de personas infectadas, 350 millones de personas en riesgo de contraer la enfermedad y cada año se registran aproximadamente dos millones de nuevos casos. Esta enfermedad constituye un grave problema de salud pública debido a sus grandes costes a nivel psicológico, socio-cultural y económico. Sin embargo, estos datos no son reales porque sólo en 33 países la denuncia de la enfermedad es obligatoria por lo que la mayoría de los casos no son registrados. La leishmaniasis se considera una enfermedad emergente dado el aumento del número de enfermos debido a las modificaciones climáticas, a las migraciones de las poblaciones, a la resistencia de los flebotominos a los insecticidas, a la dificultad para eliminar la infección en los animales reservorios y a la co-infección con el virus del VIH. La leishmaniasis es una enfermedad típica de los países en vía de desarrollo de trasmisión rural, localizada en las áreas remotas de los suburbios urbanos donde hay escasas condiciones sanitarias y socio-económicas y donde tampoco se diagnostica la enfermedad por falta de atención médica y recursos sanitarios. El diagnóstico de esta enfermedad es complicado debido al amplio espectro de manifestaciones clínicas, a menudo inespecíficas, que puede mostrar la enfermedad, por lo tanto el estudio y diagnóstico epidemiológico requieren un marcador eficaz para cada especie y cepa de Leishmania. Hasta el día de hoy muchas fracciones antigénicas han sido propuestas pero ninguna alcanza estos requisitos. Las Superóxido Dismutasas (SODs) constituyen un grupo de metaloenzimas antioxidantes encargadas de eliminar del medio el ion superóxido (O2-) por su dismutación en peróxido de hidrógeno y oxígeno molecular. La totalidad de los protozoos parásitos investigados hasta la fecha han demostrado poseer actividad SOD ligada a hierro, considerándose un factor de virulencia, al permitir a los parásitos sobrevivir a la ofensiva oxidante puesta en marcha por el hospedador y así establecerse en él. La actividad de la SOD ha sido detectada en Plasmodium falciparum, Entamoeba histolytica, Acanthamoeba castellani, Toxoplasma gondii y Trichomonas spp., en al menos un estadio de su ciclo de vida. Del mismo modo, estudios llevados a cabo con parásitos pertenecientes a la familia Trypanosomatiæ han corroborado la presencia de al menos dos actividades SOD, como sucede en los casos de T. cruzi, T. brucei o Phytomonas spp.. El proyecto de investigación que se lleva a cabo en esta tesis doctoral tiene como objetivo principal la purificación de una proteína: Superóxido Dismutasa excretada por 4 especies de Leishmania y su uso en el diagnóstico, tanto por Western blot como por ELISA. Diseñando, de esta manera, un diagnóstico, rápido, eficaz, especifico, sensible y de bajo coste.