Mecanismos moleculares que regulan la sensibilidad de células tumorales de mama a la apoptosis por TRAIL

Resumen

TRAIL es un ligando de la familia de TNFa con un gran potencial terapéutico debido fundamentalmente a su capacidad de inducir apoptosis en diferentes tumores humanos tanto in vitro como in vivo, sin que afecrte a células normales. Sin embargo, a pesar de ello, se ha encontrado que algunas células tumorales, especialmente células tumorales de mama, son rsistentes a TRAIL por razones poco conocidas. De hecho, se conoce muy poco acerca del mecanismo que regula la sensibilidad de las células tumorales a la apoptosis inducida por TRAIL . En esta tesis se ha tratado de aportar algo de luz sobre la regulación de la apoptosis inducida por TRAIL en células tumorales de mama. Se conoce que un alto porcentaje de tumores de mama tienen una actividad de la vía MAPK aumentada. En esta tesis se ha estudiado el impacto de la activación de la vía de MARK/Erk1/2 en la regulación de la apoprosis inducida por TRAIL tomando como modelo la línea tumoral MCF-7. Se encontró que cuando se activaba la ruta de MARPK, la apoptosis inducida por TRAIL era inhibida de manera independiente de la síntesis de nuevas porteínas. Utilizamos una construcción Full-Bid-GFP se observó que aunque localizaron mitocondrial del Bid-GFP cortado eera reducida. Se examinó la translocación de tBid a la mitocondria con una proteína de fusión GFP-Tbid y se encontró que la localización mitocondrial era inhibida, al menos parcialmente, cuando la vía de MAPK era activada. La localización mitocondrial de la proteína GFP-tBid con un dominio BH3 turcado estaba también reducida tras la activación de MAPK. Más aún, en células permeabilizadas con digitonina, la liberación de citocromo-c de la mitocondria inducida por tBID recombinante era también reducida tras la activación de MAPK. Estos datos indican que la vía de MAPK/Erk1/2 inhibe la apoptosis inducida por TRAIL en células MCF-7 inhibiendo la localización de tBID en la mitocondria. Por otra parte, se h