Avances en el análisis de benzimidazoles en muestras alimentarias, mediambientales y clínicas

Resumen

En esta Tesis se han desarrollado diferentes métodos para la determinación de residuos de BZs y otros fármacos de origen veterinario y humano en matrices alimentarias, ambientales y clínicas. En el caso de los alimentos, la legislación vigente establece para estos compuestos unos Límites Máximos de Residuos (MRLs) que no deben ser superados con objeto de garantizar la calidad del producto y permitir su distribución y consumo. Por otro lado, la incorporación constante en el medioambiente de estos residuos sin el debido control está provocando serios problemas en los ecosistemas receptores que obligan al desarrollo de metodologías para su cuantificación y posterior evaluación de riesgos. Además, con el fin de seleccionar la dosis apropiada de un fármaco que evite riesgos innecesarios en la salud del animal, también es necesario el uso de métodos analíticos para el control de los principios activos de estos fármacos en fluidos biológicos. Considerando las recientes e importantes mejoras de las técnicas separativas en cuanto a la miniaturización, aumento de la eficacia, alta sensibilidad, elevada resolución y bajo consumo de disolventes y muestra, en esta Tesis Doctoral se propone la utilización de la CE y la cromatografía líquida (LC), en sus diversas modalidades, además de la IMS, con objeto de explorar las ventajas mencionadas. Junto con la detección UV/Vis y la detección FL, a lo largo de esta Tesis se han considerado la MS debido a las ventajas que aporta como sistema de detección, tales como la identificación inequívoca de los analitos. Además, se ha utilizado IMS acoplada a MS ya que proporciona información complementaria, como es la sección transversal de colisión (CCS). Es importante señalar que en esta Tesis Doctoral se presentan, por primera vez los sistemas CEC-UV y CE-MS/MS como poderosas herramientas para la determinación de BZs y sus metabolitos. Además, es la primera vez que muchos de estos residuos y otros fármacos de uso humano y veterinario han sido caracterizados en términos de CCS haciendo uso de la IMS-MS. Además, se han propuesto tratamientos de muestra rápidos, simples y poco contaminantes con el objetivo de alcanzar una alta eficacia en la extracción y un alto rendimiento en el tratamiento de muestra. A continuación se describe brevemente el trabajo desarrollado: o En el Capítulo 1, se describe un método simple para la determinación de dieciséis BZs en diferentes muestras de leche mediante CLC-UV como técnica separativa y extracción líquido-líquido asistida por sales (SALLE) como técnica de tratamiento de muestra. o En el Capítulo 2, se propone un nuevo método para la determinación de trece BZs en muestras de pescado. Para este propósito se empleó UHPLC-FL como técnica separativa y SALLE para el tratamiento de muestra. o En el Capítulo 3, se llevó a cabo el desarrollo de un nuevo método para la determinación de doce BZs, empleando la electroforesis capilar zonal acoplado a la espectrometría de masas en tándem (CZE-MS/MS). Con el fin de mejorar la sensibilidad del método se llevó a cabo una preconcentración dentro del capilar (on-line). El método fue aplicado a diferentes tipos de carne haciendo uso de la micro-extracción líquido-líquido dispersiva (DLLME). o En el Capítulo 4, se propuso un nuevo método para la determinación de trece BZs, haciendo uso de la cromatografía electrocinética micelar acoplada a la espectrometría en masas en tándem (MEKC-MS/MS) y empleando un surfactante volátil como electrolito de fondo. Para aumentar la sensibilidad del método se aplicó como técnica de preconcentración dentro del capilar (on-line) el denominado sweeping. Este método fue aplicado al análisis de muestras de orina animal haciendo una simple dilución de la muestra. o En el Capítulo 5, se describe un nuevo método para la determinación de siete BZs en muestras de agua de diferente procedencia mediante CEC-UV, utilizando capilares de sílice fundida empaquetados en el laboratorio. Para aumentar la sensibilidad del método se aplicó una preconcentración dentro del capilar (on- o line) inyectando la muestra en un disolvente con menor fuerza de elución que la fase móvil, aplicando también una preconcentración previa (off-line) de los analitos mediante la DLLME. o Finalmente, en el Capítulo 6, se recoge el trabajo desarrollado durante la estancia predoctoral en el “Laboratorire d’etude des residus et contaminants dans les aliments” (LABERCA, Francia), que consistió en la creación de una base de datos con los valores de CCS obtenidos mediante IMS-MS de 92 fármacos humanos y veterinarios. Con el fin de evaluar la aplicabilidad de esta base de datos, once fármacos veterinarios fueron analizados en orina de oveja.