Citotoxicidad inducida por cisplatino. Estudio experimental in vitro en células de feocromocitoma de rata pc-12

Zusammenfassung

El cisplatino es un agente quimioterápico usado ampliamente para el tratamiento de diversos tipos de tumores pero cuya dosis total está limitada por sus efectos adversos, principalmente en riñón y sistema nervioso periférico. La incidencia de nefropatía se ha reducido significativamente por las diuresis por cloruros, pero no la neurotoxicidad que es, actualmente, el principal factor limitante de la dosis, lo que disminuye la eficacia anticancerosa de este fármaco. Con la finalidad de profundizar en el conocimiento de los mecanismos involucrados en la citotoxicidad inducida por cisplatino nos planteamos los siguientes objetivos: 1,- Establecer un modelo experimental in vitro de citotoxicidad inducida por dosis terapéuticas de cisplatino mediante la utilización de la línea celular de feocromocitoma de rata PC12 indiferenciadas. 2,- Evaluar las ateraciones en la proliferación y viabilidad celular provocadas por el cisplatino, mediante el empleo de la sal de tetrazolio VST-1 y azul tripán, respectivamente. 3,- Evaluar los mecanismos de muerte celular inducida por cisplatino mediante la utilización de parámetros morfológicos (micoscopía de fluorescencia y electrónica de transmisión) y bioquímicos (estudio de la fragmentación del ADN). 4,- Evaluar las alteraciones en la composición elemental de las células PC-12 durante la progresión de la lesión celular inducida por el cisplatino mediante la utilización del microanálisis por energía dispersiva de rayos X. Nuestros resultados demuestran que el cisplatino inhibe la proliferación de las células PC-12 debido a la inducción de la muerte de dichas células. Éstas muestran con microscopía de fluorescencia una morfología nuclear típica del mecanismo de muerte celular por apoptósis, mientras que con el microscopio electrónico de transmisión, aparecen además, cambios en el citoplasma característicos de necrosis u oncosis. Mediante la electroforesis d