Características bioquímicas de la apóptosis inducida por la inhibición de la timidilato-sintasa o por la activaciónde receptores de muerte celular

Zusammenfassung

El desbalance en los niveles de nucleótidos trifosfato induce apoptosis en células hematopoyéticas. En este trabajo se ha estudiado la implicación de la proteína supresora de tumores p53 y la relación con la vía de apoptosis inducida por ligandos de muerte. La timidina exógena, pero no la uridina, inhibió la muerte inducida por el inhibidor de la timidilato-sintasa 5-fluoro-2'deoxiuridina (FUdR). La acumulación de p53 no fue necesaria para este proceso de muerte. Se observó liberación de citocromo c durante este proceso, y esto se produjo en ausencia de activación de caspasas. La caspasa/8 se activó, pero esta activación no resultó esencial para el desarrollo de la apoptosis. La despolarización mitocondrial observada ocurrió como consecuencia, no como causa, de la activación de caspasas. La inhibición de la glicolisis produjo la inhibición de la muerte inducida por FUdR, inhibiéndose este proceso en un punto anterior a la liberación de citocromo c. Sin embargo, en las mismas condiciones, se potenció la apoptosis inducida por activación de receptores de muerte de la familia del receptor del Factor de Necrosis Tumoral alga (TNF-alfa). Se demostró que las células, en condiciones de bajo ATP, seguían muriendo por apoptosis, no por necrosis. En medio sin glucoso, o en presencia del inhibidor de la glicolisis 2-deoxiglucosa, se observó sensibilización de varias líneas tumorales a la apoptosis inducida por TNF-alfa, TRAIL y un anticuerpo activador de Fas. Tanto la activación de caspasas como la vía mitocondrial estaban potenciadas en estas condiciones, y se determinó que incluso la activación de la caspasa-8 apical ocurría antes en ausencia de glucosa que en medio de cultivo con glucosa. Este fenómeno se observó en varias líneas tumorales de distinto origen, lo que sugiere nuevas posibildiades terapéuticas del uso combiando de inhibidores de glicólisis y ligandos de muerte que matan selectivamente cé