Regulación de la expresión y la función de receptores de muerte celular

Resumen

La presente disertación comprende los estudios realizados sobre el papel de CD95L/FasL en la muerte celular por activiación inducida con carbacol, producida en la línea de células humanas lelucémicas T Jurkat JHM.1 (que expresan el receptor muscarínico para carbacol) y los estudios sobre la regulación de la expresión del receptor de muerte CD95/Fas. Además, se aclara el papel de PKC en la regulación de la apoptosis inducida por TRAIL, tanto en la línea celular leucémica T Jurkat, como en la línea celular de cancer de mama MCF-7, y se analiza la implicación de MEK-1, de la vía de ERK, en la apoptosis producida por TRAIL, CD95/Fas y la droga doxorubicina. Hemos encontrado que en la línea celular leucémica humana T Jurkat, la vía de ERK es necesaria para la muerte celular a través del HMR1, estimulado con carbacol, y que la expresión del ARNm de CD95 se regula positivamente con agentes farmacológicos, PDBu e ionóforo, que imitan la activación de células T. La inducción del promotor de CD95 dependiente de activación requiere los nucleótidos -391 a -331. La estimación por activación del CD3 en combinación con ésteres de forbl, también induce la actividad del promotor de Fas. P21 Ras esta parcialmente implicado en las vías de señalización al servir de enlace en la activación de células T Jurkat por ionóforo y PDBu. MEK-1 participa parcialmente en la transmisión de señales estimuladores desde Ras al gen Fas; Rac no esta implicado en la activación del promotor de Vas, el estimularlo con ionóforo y PDBu. La activación del promotor de Fas a través de PDBu/ionóforo y de CD3/ionóforo, es sensible al inhibidor de calcineurina CsA. También el facor de transcripción NFAT esta parcialmente implicado en la activación del promotor de Fas inducida por PDBu e ionóforo. En la línea de células leucémicas humanas T Jurkat, hemos encontrado que la activación de PKC previene la activación de caspasas, la f