Puesta a punto de un nuevo calorímetro de titulacion Gill. Caracterizacion termodinamica de la interaccion barnasa-3'gmp

Résumé

En esta tesis se ha puesto a punto un segundo modelo de la segunda generacion de calorimetros de titulacion desarrollados en el laboratorio del profesor s.J. Gill, de la universidad de colorado (usa). Posteriormente se evaluo el calorimetro como instrumento capaz de realizar, en un solo experimento, la caracterizacion termodinamica completa de interacciones biomoleculares, es decir, de medir no solo la variacion de entalpia sino tambien la constante de equilibrio, con la determinacion consiguiente de las variaciones de energia de gibbs y entropia. Para ello se ha desarrollado el software de simulacion de las curvas de valoracion calorimetricas y de analisis de las mismas para la obtencion de dichos parametros. Por ultimo, se ha aplicado el calorimetro al estudio de una reaccion bioquimica de interes, la de la barnasa con su inhibidor 3'gmp, con la determinacion de parametros termodinamicos ( g , h , s , cp ) caracteristicos de la interaccion a diferentes ph para la enzima silvestre y algunos mutantes.