Apoptósis inducida en la línea celular prostática lncapvaloración del posible efecto inductor de resistencia tras la adición de neuropéptidos

Laburpena

INTRODUCCIÓN El carcinoma prostático es una enfermedad típicamente refractaria al tratamiento hormonal. En estudios recientes se ha visto que, además de los andrógenos, hay otras sustancias implicadas en el normal desarrollo y funcionamiento de la glándula prostática, tales son los factores de crecimiento peptídicos y los neuropéptidos. A este respecto, se ha visto que la diferenciación neuroendocrina se asocia con un peor pronóstico y estadio tumoral más avanzado. El cultivo de células tumorales es una herramienta muy útil a la hora de estudiar la biología del cáncer, ya que nos permite recrear distintas condiciones o añadir al medio distintas sustancias y ver cómo responden a ellas las células cancerosas. En la presente tesis doctoral hemos empleado la línea celular prostática andrógeno-sensible LNCaP para intentar aclarar el papel que desempeñan los neuropéptidos en la biología del carcinoma prostático. OBJETIVOS 1,- Obtención de patrones cualitativos y cuantitativos en células prostáticas neoplásicas sometidas a tratamiento inductor de apoptosis. 2,- Comprobar si los neuropéptidos son capaces de inducir resistencia a la apoptosis, a través de estudios morfológicos y cuantitativos. 3,- Valorar la aparición de subpoblaciones tumorales en distintos estadios apoptóticos, en los distintos grupos de tratamiento, mediante criterios morfológicos y cuantitativos. 4,- Cuantificar la relación existente entre los productos de secreción de las células neuroendocrinas y el establecimiento y evolución del proceso de apoptosis. MATERIAL Y MÉTODO Se establecieron distintos grupos de tratamiento en la línea celular LNCaP (control, etopósido, bombesina y etopósido mas bombesina). Al final de cada experimento los grupos se procesaron para tinción hematoxilina-eosina, tinción DAPI y cuantificación de las concentraciones de calcio intracelular (mediante el uso de fluo-3 y Fluoroskan Ascent(