Estudio de la capacidad antiproliferativa en modelos celulares de cáncer de mama de un extracto de hoja de olivo enriquecido en polifenoles

Resumen

En las últimas décadas se han logrado nuevos avances en el descubrimiento de fármacos contra el cáncer utilizando compuestos naturales, entre los cuales los polifenoles han surgido como moléculas prometedoras. Pueden actuar sobre varios objetivos moleculares debido a su comportamiento promiscuo, presentando varios efectos fisiológicos, algunos de los cuales confieren actividad antitumoral. El objetivo del presente trabajo ha sido optimizar las condiciones de extracción de un extracto de hoja de olivo con capacidad antitumoral en modelos celulares de cáncer de mama ya demostrada y determinar la capacidad antiproliferativa, así como el mecanismo de acción, de los principales compuestos activos de dicho extracto, la diosmetina, la apigenina y la luteolina. Para estudiar el mecanismo de acción por el cual estos compuestos inhiben la proliferación celular se llevaron a cabo ensayos de viabilidad y citotoxicidad, así como ensayos relacionados con la viabilidad mitocondrial y el estrés oxidativo. Además, se ha analizado la permeabilidad intestinal de los compuestos mediante el uso de monocapas de células intestinales Caco-2 como modelo de epitelio intestinal y a partir de sus estos resultados se ha estimado el potencial de atravesar la barrera hematoencefálica (BHE). Por último, se estudiaron las interacciones sinérgicas para la capacidad antiproliferativa entre los tres compuestos en combinaciones dobles y triples. Los resultados obtenidos demuestran que la combinación de los compuestos diosmetina, apigenina y luteolina posee un efecto antiproliferativo en modelos celulares de los tres subtipos moleculares, luminal, HER2+ y triple negativo (TNBC), así como en un modelo celular metastásico de cerebro, siendo además este efecto selectivo de las células tumorales puesto que es muy inferior en un modelo celular de tejido no tumoral. El mecanismo de muerte principal para las líneas celulares de cáncer de mama luminal y TNBC fue la apoptosis con daño mitocondrial y aumento de la producción de especies reactivas de oxígeno, observándose de manera secundaria un efecto citostático. Por el contrario, en la línea celular de cáncer de mama HER2+ se observó principalmente un efecto citostático y secundariamente un efecto apoptótico con un leve daño mitocondrial. Además, se determinó que los tres compuestos presentan una permeabilidad intestinal moderada y que son buenos candidatos para atravesar la barrera hematoencefálica. En cuanto a los efectos sinérgicos para la capacidad antiproliferativa, los compuestos mostraron interacciones dependientes de la ratio, es decir, que dependiendo de la ratio pueden presentar tanto sinergia, como aditividad o antagonismo. Los resultados obtenidos justifican la utilización de la combinación de diosmetina, apigenina y luteolina en nuevos ensayos que profundicen en su mecanismo de acción, así como estudios in vivo que confirmen sus capacidades antitumorales en modelos animales cáncer de mama, además de su permeabilidad intestinal y hematoencefálica.