Modulación de la expresión génica de mascadores de fibrogénesis y de funcionalidad hepática por los nuleósidos en cultivos celulares

Resum

Los nuleótidos, sillares estructurales de los ácidos nucleicos, son considerados como nutrientes semiesenciales. En estudios recientes, se ha evaludado el efecto preventivo y recuperador de los nuleótidos de la dieta frente al daño hepático caudado por la administraciónde tioacetamida. Estos efectos estarían a través de la modulación de la expresiónd e genes relacionados conla fibrogénesis. El objetivo de este trabajo fue evaluar los potenciales efectos de los nucleósidos sobre la expresión de genes marcadores de fibrogénesis y funcionalidad hepática, en cultivos celulares. Se han caracterizado tres modelos de cultivo de células estelares, de hepatocitos adultos y de cultivos de ambos tipos celulares, en cuanto a su tasa metabólica y su capacidad de síntesis de proteínas de la matriz extracelular, encontrándose que los cocultivos reproducen fielmente los estadios tempranos del proceso de fibrogénesis. Los nucleósidos adicionados a los medios de cultivo son captados e incorporados por las células estelares, los hepatocitos y los cocoultivos, modificando las concentraciones intracelulares de nucleótidos solubles, espcialmente ATP, GTP y UDP-glucosa, lo que se traduce en la modificación de la biosíntesis de glicoproteínas de la matriz extracelular. Los nuleósidos, en su rango de concentraciónde 1 a 100uM, no producen efectos tóxicos en los sistemas de cultivo ensayados. Asimismo, los cambios en el perfil de nucleótidos intracelulares no afectan a la proliferación de las células estelares y de los hepatocitos en los cultivos individuales y en los cocultivos. Los nucleosidos exógenos aumentan la producción de bibronectina y de laminina tanto en los cultivos de células estelares activadas como en los hepatocitos, Asimismo, la producción de colageno en las células estelares aumenta por efecto de los nucleósidos. La adición de los nuleósidos al medio de los cocultivos de células estelares y