Interacción purina/complejos de ru(ii) con fosfinas solubles en agua. Estudio de los compuestos resultantes

Résumé

El presente trabajo dió lugar a la síntesis y caracterización de los compuestos de fórmula general [RuCp(L)(PPh3)(PTA)] (L = Ad, Gu, Tf, 8-TTH, 8-MTT, 8-BzTT) por reacción de [RuClCp(PPh3)(PTA)] con los derivados de la purina adenina (AdH), guanina (GuH), teofilina (TfH) y sus derivados 8-TTH2, 8-MTTH y 8-BzTTH. Para que la reacción tenga lugar es necesario la desprotonación previa de las bases púricas. Se sintetizaron y caracterizaron los compuestos de fórmula general [{RuCp(PPh3)(PTA)}2(L)] (L = MBTT, EBTT, PBTT) por reacción de [RuClCp(PPh3)(PTA)] con MBTTH2, EBTTH2 y PBTTH2 previamente desprotonadas en etanol. También se sintetizaron en etanol y caracterizado los compuestos de fórmula general [RuCp(L)(PPh3)(mPTA)](CF3SO3) (L = Ad, Gu, Tf, 8-TTH, 8-MTT, 8-BzTT) por reacción de [RuClCp(PPh3)(mPTA)](CF3SO3) y adenina (AdH), guanina (GuH), teofilina (TfH), 8-TTH2, 8-MTTH y 8-BzTTH previamente desprotonadas, así como los compuestos de fórmula general [{RuCp(PPh3)(mPTA)}2(L)](CF3SO3)2 (L = MBTT, EBTT, PBTT) por reacción de [RuClCp(PPh3)(PTA)](CF3SO3) con MBTTH2, EBTTH2 y PBTTH2 previamente desprotonadas. Por otra parte, se sintetizaron en agua y caracterizaron los compuestos de fórmula general Na2[RuCp(L)(mTPPMS)2] (L = Ad, Gu, Tf, 8-TTH, 8-MTT, 8-BzTT) por reacción de Na2[RuClCp(mTPPMS)2] con adenina (Ad), guanina (Gu), teofilina (Tf), 8-TTH2, 8-MTTH y 8-BzTTH desprotonadas con KOH, así como los compuestos de fórmula general Na4[{RuCp(mTPPMS)2}2(L)] (L = MBTT, EBTT, PBTT) por reacción de Na2[RuClCp(mTPPMS)2] con MBTTH2, EBTTH2 y PBTTH2 desprotonada, y los compuestos de fórmula general [{RuCp(PTA)2}2(L)] (L = MBTT, EBTT, PBTT) por reacción de [RuClCp(PTA)2] con MBTTH2, EBTTH2 y PBTTH2 desprotonadas y los compuestos de fórmula general [{RuCp(mPTA)2}2(L)](CF3SO3)4 (L = MBTT, EBTT, PBTT) por reacción de [RuClCp(mPTA)2](CF3SO3)2 con MBTTH2, EBTTH2 y PBTTH2 desprotonados. Se determinó que los complejos [RuClCp(mPTA)(PPh3)](CF3SO3) y [RuClCp(PTA)(PPh3)] mostraban una reactividad parecida frente a las purinas estudiadas. De entre ellos se caracterizó por rayos X de monocristal la estructura de los compuestos [RuCp(Ad-¿N9)(PPh3)(PTA)].H2O y [RuCp(8-MTT-S)(mPTA)(PPh3)](CF3SO3). Dichas estructuras mostraron como la coordinación del ligando adenina se realiza en todos los casos a través del nitrógeno N9 imidazólico, mientras que el ligando 8-MTT se encuentran en el compuesto [RuCp(8-MTT-S)(mPTA)(PPh3)](CF3SO3) en un modo de coordinación absolutamente novedoso para el mismo, a través del S8 y no de N7 imidazólico. Los derivados 8-MTT y 8-BzTT no muestran en ninguno de los complejos sintetizados en esta tesis, protones coordinados a los nitrógenos N7 ni N9 imidazólicos. La coordinación de las bis-tiopurinas MBTT, EBTT y PBTT al átomo metálico en los complejos se realiza de forma que los dímeros se unen al metal a través del átomo N7 imidazólico. Esta nueva forma de coordinación mostró claramente que los nuevos complejos de rutenio solubles en agua prefieren coordinarse a una posición coordinativa blanda en lugar de una dura, por lo que es previsible que interaccionarán fácilmente con los grupos tio de las proteínas y por lo tanto pueden modificarlas induciendo comportamientos en los sistemas biológicos vivos inusuales y no conocidos hasta el momento. Se han ensayado la actividad biológica de los complejos de partida [RuClCp(PPh3)(PTA)2] y [RuClCp(PPh3)(mPTA)](CF3SO3), frente a las líneas celulares T2 y Skov3 sensible y resistente a cis-platino, respectivamente. El complejo de partida [RuClCp(PPh3)(PTA)2] y sus derivados muestran una actividad frente a la línea T2 similar, en la mayoría de los casos, o comparable a la mostrada por el cis-platino, llegando incluso a tener un mayor porcentaje de inhibición de crecimiento en el caso del complejo con adenina [RuCp(Ad-¿N9)(PPh3)(PTA)]. En los ensayos con células resistentes a cis-platino (Skov3), se obtuvieron resultados similares de actividad a bajas concentraciones (2 y 10 µM) respecto a cis-platino. Sin embargo, cuando se usaron concentraciones de 50 µM, se observaron valores de actividad anticancerígena significativamente mayores, siendo claramente superior aquellas de los complejos de rutenio con teofilina, adenina y 8-BzTTH que las observadas para el cis-platino. El complejo de partida [RuClCp(PPh3)(mPTA)](CF3SO3) y la mayor parte de sus derivados con purina, han mostrado una mayor eficacia en la actividad biológica de los compuestos ensayados frente a la línea T2 sensible a cis-platino. Para todos los complejos evaluados la actividad frente a esta línea celular es marcadamente mayor que la observada para el cis-platino, excepto en el caso de los derivados de rutenio de 8-TTH2 a bajas concentraciones. El complejo [RuClCp(PPh3)(mPTA)](CF3SO3) y sus derivados mostraron frente a la línea Skov3 unos porcentajes de inhibición de crecimiento de células cancerosas muy superiores a la observada para cis-platino. Sin embargo, a bajas concentraciones los resultados fueron similares para todos los complejos evaluados, pero en cualquier caso seguían siendo superiores al observado para el cis-platino. El derivado de rutenio con guanina presentó la mayor actividad biológica. La evolución del valor de porcentaje de inhibición de crecimiento en ambos tipos de líneas celulares iba en paralelo al valor del potencial anódico Ea de los complejos especialmente en la línea T2 (sensible al cis-platino) sobre todo a concentraciones de 50 y 10 µM. El menor valor del potencial anódico Ea de los compuestos con 8-TTH podría explicarse por su baja solubilidad en DMF y H2O siendo a su vez la baja solubilidad la posible causa de la baja actividad biológica presentada por estos compuestos.