Lacasa de phanerochaete flavido-albaregulación, expresión heteróloga y comparación de las formas nativa y recombinante

Résumé

Los hongos de la podredumbre blanca constituyen un interesante grupo de organismos con gran potencial biotecnológico debido a su habilidad para degradar el polímero de la lignina y compuestos aromáticos. La lacasa de Phanerochaete flavido-alba tiene unas propiedades que la hacen particular entre las enzimas de este tipo de los basidiomicetos. El objetivo principal de este trabajo ha sido estudiar la inducción, producción, purificación de esta lacasa, y expresión heteróloga del gen que la codifica en Aspergilus niger. Para ello hemos definido los efectos de inhibidores de histona desacetilasas (HDACs) y el efecto de otros inductores aromáticos sobre la producción de la enzima nativa. Finalmente el trabajo describe un sistema de expresión heteróloga del gen de lacasa de P. flavido-alba que ha permitido la caracterización físico-química de la enzima expresada. Además ha permitido estudiar la capacidad de esta enzima recombinante para degradar colorantes textiles. Los resultados presentados en esta tesis doctoral confirman su potencial aplicación en este tipo de estrategias de biorremediación. En este sentido hemos demostrado que la laccasa de P. flavido-alba puede producirse en cantidades razonables en A. niger, con mayor rendimiento que la lacasa nativa y con propiedades ventajosas como su estabilidad a pH alcalino y frente a disolventes orgánicos. Además, hemos comprobado que no necesita mediadores redox para oxidar de manera eficiente dos colorantes textiles de diferente estructura química. Todos estos resultados indican la utilidad potencial de la lacasa recombinante de P. flavido-alba.