Firmas génicas de respuesta al tratamiento neoadyuvante en el cáncer de recto

Resumen

Introducción En la actualidad, la radioquimioterapia preoperatoria desempeña un papel básico en el manejo multidisciplinar del cáncer de recto localmente avanzado, consiguiendo mejorar el control local de la enfermedad. Sólo un pequeño porcentaje de pacientes (20-40%) muestran una buena respuesta al tratamiento y no existe ninguna prueba diagnóstica fiable que nos permita identificar qué pacientes se van a beneficiar. Además, el tratamiento neaodyuvante, no está exento de efectos adversos como incontinencia fecal, lesiones nerviosas, complicaciones sépticas, entre otras, que sería deseable evitar precisamente en los pacientes no respondedores, así como ser capaces de poder ofrecerles una alternativa terapéutica dentro del concepto de lo que se ha denominado medicina individualizada. El objetivo de éste estudio es la identificación de genes predictores de respuesta al tratamiento neoadyuvante en pacientes con adenocarcinoma de recto localmente avanzado mediante la tecnología de microarrays. Material y Métodos Se tomaron biopsias de tejido tumoral antes de iniciar la neoadyuvancia, a las cuales se les extrajo el material genético que se utilizó para hibridar con microarrays de ADN (genoma completo) y se determinaron los genes sobre-expresados en cada muestra. Los pacientes recibieron radioquimioterapia durante 5 semanas (50,4 Gy en 28 fracciones de 1,8 asociado a capecitabina o capecitabina y oxaliplatino), seguido de un período de latencia de 8 semanas. Posteriormente, se intervinieron mediante la técnica habitual de escisión mesorrectal completa. La respuesta al tratamiento se evaluó mediante los grados de remisión tumoral de Mandard en la pieza quirúrgica, clasificándose como sujetos respondedores los grados 1 y 2 y como no respondedores los grados 3-4-5. Esta respuesta se relacionó con los perfiles genéticos. Los resultados obtenidos se validaron mediante qRT-PCR. Para profundizar en el conocimiento de este perfil genético se cotejaron los datos mediante la herramienta informática IPA (Ingenuity Pathways Analysis), determinando las vías metabólicas en las que están implicados. Por último, mediante hibridación in situ fluorescente (FISH) e inmunohistoquímica (IHQ) se trató de identificar el mecanismo de sobre-expresión del gen más representativo, c-MYC, así como la correlación con la expresión de la proteína c-MYC en las biopsias de tejido tumoral. Resultados Se comprobó que existía un grupo compuesto por 257 genes cuya sobre-expresión se asoció a una buena respuesta a la neoadyuvancia. Se validaron mediante qRT-PCR cuatro de ellos: c-MYC, GNG4, POLA y RRM1. Estos 257 genes se relacionaron, sobre todo, con la ruta de c-MYC, metabolismo de las pirimidinas y señalización celular o con la proliferación y crecimiento celular. Los datos de la FISH demostraron que los pacientes respondedores, con sobre-expresión de ARNm de c-MYC, tenían un número normal de copias del gen a nivel del ADN y, por lo tanto, el mecanismo de sobre-expresión es independiente de la amplificación. Al realizar la tinción con IHQ se comprobó que todos los tumores, respondedores o no, tenían sobrexpresada la proteína c-MYC a nivel del núcleo celular, mientras que estaba ausente en todas las muestras de tejido normal. Podría así comportarse como un marcador de malignidad. La sobre-expresión de los cuatro genes validados, c-MYC, GNG4, POLA y RRM1, en muestras de tejido tumoral antes de iniciar la neoadyuvancia ha demostrado una buena correlación con la respuesta, especialmente para c-MYC (sensibilidad del 60% y especificidad del 100%). Cuando se evaluó la firma génica en su conjunto, es decir c-MYC, GNG4, POLA y RRM1, también se obtuvo una buena capacidad de predicción de respuesta. Los pacientes con sobre-expresión de tres de los cuatro genes serán respondedores con una alta especificidad (100%) y valor predictivo positivo (100%) y con una sensibilidad, valor predictivo negativo y una exactitud algo más bajos (del 60%, 80% y 85%, respectivamente). Conclusiones Existe un perfil genético en muestras de adenocarcinoma de recto localmente avanzado que se asocia a buena respuesta a la radioquimioterapia preoperatoria. El gen con mejor capacidad de predicción es c-MYC. Se ha descartado que esta sobre-expresión se deba a amplificación del gen. A nivel proteico no hay diferencias en cuanto a la presencia de proteína c-MYC entre pacientes respondedores y no respondedores.