Estudio de la señal de localización y comportamiento dinámico del factor de transcripción y splicing tcerg1

Resumen

El núcleo de la célula eucariota es una estructura altamente compartimentalizada, donde el material genético se dispone a modo de territorios cromosómicos que dejan lugar a un gran número de subestructuras u orgánulos nucleares. A pesar del aparente estado estático de los orgánulos nucleares, sus proteínas están sometidas a un elevado dinamismo, probablemente debido a la falta de membranas que delimitan su estructura, característica que los diferencia de los orgánulos citoplasmáticos. En este movimiento proteico generalizado dentro del núcleo las señales de localización juegan un importante papel, pues a ellas se debe la correcta distribución de los componentes de cada uno de los diferentes orgánulos. En esta tesis hemos identificado y caracterizado la señal responsable de la localización del factor de transcripción y splicing TCERG1 en la periferia de los speckles nucleares, orgánulos enriquecidos principalmente en factores de splicing como por ejemplo las proteínas SR o las partículas snRNP. Dentro de TCERG1, los dominios FF4/FF5 (aminoácidos 878 a 1021) son la señal necesaria y suficiente para la correcta localización de la proteína. Además estos dominios constituyen la señal suficiente para la localización de otras proteínas en los speckles nucleares. De esta manera, los dominios FF4/FF5 de TCERG1 representan una nueva señal de localización general hacia los speckles nucleares no identificada hasta el desarrollo de esta tesis. Nuestros estudios encaminados a conocer las bases moleculares en las que se sustenta el papel de los dominios FF4/FF5 como señal de localización hacia los speckles nucleares han identificado a la proteína Nopp140 como la posible responsable de esta localización. De acuerdo con el elevado dinamismo ya citado, TCERG1 presenta una alta movilidad en el núcleo, que se muestra prácticamente idéntica en los diferentes compartimentos estudiados (speckles nucleares y nucleoplasma). Este movimiento se muestra además independiente del estado transcripcional de la célula. Los estudios de FRAP (fluorescence recovery after photobleaching) realizados para determinar todos estos parámetros han sido empleados también para describir las propiedades dinámicas de TCERG1 en relación a las maquinarias de transcripción y splicing, aportando datos que apoyan el papel ya propuesto para TCERG1 en el acoplamiento entre ambas maquinarias.