Anomalías en el perfil de metilación como biomarcador en el cáncer de mama

Resumen

El cáncer de mama es un importante problema de salud a nivel mundial. Actualmente representa el tipo de cáncer más frecuentemente diagnosticado en la mujer con una incidencia que en 2008 alcanzó una cifra de 1.38 millones de nuevos casos, situándose como la 5ª causa de muerte específica por cáncer. No obstante gracias a la mayor divulgación y desarrollo de los programas de cribado poblacional, se ha conseguido disminuir su mortalidad en un 2% al año lo que ha supuesto una reducción total del 20% de mortalidad por esta causa. Sin embargo y a pesar de las mejoras técnicas y la mayor concienciación social que existe respecto a esta patología, aún hoy día el 32% de las mujeres llegan al diagnóstico en estadios localmente avanzados lo que empobrece notablemente el pronóstico de la enfermedad y hasta un 6% de los casos lo hacen en estadios metastásicos donde la enfermedad no es curable. OBJETIVOS: Esta Tesis Doctoral tiene como objetivo encontrar potenciales biomarcadores que aislados en el suero de mujeres sanas y unidos a las técnicas de screening habitualmente empleadas en los programas de detección precoz del cáncer de mama, ayuden a alcanzar un diagnostico más temprano que permitan mejorar las tasas de curabilidad y con ello el pronóstico del cáncer de mama. Así mismo, pretende analizar el potencial pronóstico y predictivo de respuesta que pueden tener estos biomarcadores analizados en las pacientes con cáncer de mama para poder incorporar a los factores moleculares actualmente conocidos nuevos marcadores que ayuden a personalizar el tratamiento y adelantarnos a una posible recaída de la enfermedad para ayudar al control y mejora del manejo de esta enfermedad. Para llevar a cabo estos objetivos, este trabajo de investigación se apoya en la hipótesis según la cual es posible llegar al diagnóstico de cáncer antes de que la enfermedad sea clínicamente manifiesta mediante el análisis epigenético del estado de metilación de determinados promotores a través de su estudio en sangre periférica. MATERIAL Y MÉTODOS: El presente trabajo de investigación es un estudio de tipo prospectivo que comenzó en Mayo 2001 y concluyó en Julio de 2008; periodo de tiempo en el que hemos conseguido incluir un total de 107 pacientes con cáncer de mama (grupo casos) y 110 mujeres sanas (grupo control). A todas ellas se realizó una primera extracción de 5 ml de sangre justo antes de la cirugía en el grupo casos y otra en el grupo control. Así mismo se realizó una 2ª determinación en el grupo casos una vez finalizado el tratamiento oncológico indicado. Sobre todas las muestras de suero se estudió, por PCR Cuantitativa en Tiempo Real, la concentración de ADN representativos de la región promotora de 5 biomarcadores (Receptor de Estrógenos (RE), Rar-Beta, 14-3-3 Sigma, APC y E-Cadherina) y se cuantificó el nivel de hipermetilación en las islas CpG de la región de los promotores de dichos genes. RESULTADOS: Se encontraron diferencias estadísticamente significativas en los niveles de metilación de ESR1 (p=0.0112) y 14-3-3¿ (p=0.0047) entre el grupo casos y control. Se observó que estas diferencias discriminaban entre ambos grupos con una sensibilidad del 81% (95% CI: 72-88%) y especificidad del 88% (95% CI: 78-94%). La metilación aberrante de ESR1 en el suero de las pacientes fue asociada con el fenotipo ER-negativo (p=0.0179); y la presencia de 14-3-3¿ metilado con estadios T3-4 (p<0.05) y afectación nodal (p<0.05). Así mismo se observó una correlación estadísticamente significativa entre la presencia de RE metilado en suero y ausencia de expresión de RE en tumor (p=0.0179). Observamos un mayor porcentaje de metilación del promotor de RE en aquellos fenotipos de peor pronóstico concretamente el 80% de las pacientes triple negativas y 60% de las pacientes HER2 frente al 28% y al 5.9% de las pacientes con fenotipos de mejor pronóstico como Luminal A y Luminal B respectivamente con p < 0.05. CONCLUSIONES: Las alteraciones epigenéticas del genoma como la metilación de la región promotora del ADN y remodelación de la cromatina que tienen un papel clave en la iniciación y progresión del cáncer, pueden ser detectadas y cuantificadas a partir de muestras procedentes del suero de pacientes mediante la técnica de detección del ADN por la reacción cadena de la polimerasa específica de metilación. Su cuantificación en sangre periférica en población sana a partir de los resultados obtenidos podría ser utilizada como prueba complementaria a las conocidas en el momento actual en el diagnóstico precoz si bien aún son necesarios más estudios prospectivos que validen esta técnica para dicho fin. Así mismo nuevos factores moleculares pronósticos y predictivos de respuesta en el cáncer de mama están emergiendo asociados a los utilizados en la práctica asistencial. Probablemente correlacionar estos factores moleculares con los eventos epigéneticos que median en la carcinogénesis puedan ayudar a predecir de forma más precisa el pronóstico de las pacientes diagnosticadas de cáncer de mama y nos puedan mostrar nuevas dianas moleculares sobre las que diseñar nuevas terapias dirigidas al tratamiento del cáncer.