Estudio de la ciclopropano sintasa

Resumen

Las membranas bacterianas constituyen la primer barrera física contra distintos factores ambientales adversos como por ejemplo la presencia de disolventes orgánicos. Para contrarrestar los efectos dañinos que estos pueden causarle a la bacteria, la bacteria desarrolla distintos mecanismos de tolerancia tales como las bombas de expulsión de tóxicos o modificaciones a nivel de su membrana plasmática. Esta tesis doctoral se centró en el estudio de las modificaciónes post sintéticas de los ácidos grasos de los fosfolípidos en bacterias del género Pseudomonas y su participación en respuesta a estrés. En particular el estudio del papel fisiológico de los ácidos grasos ciclopropano (CFA) en respuesta a estrés, el estudio de la regulación de la formación de los ácidos grasos ciclopropano a nivel de expreíón génica y el estudio del mecanismo de activación de la cis-trans isomerasa en respuesta a estrés. Durante esta tesis doctoral concluimos que los ácidos grasos ciclopropanos no son componentes esenciales de la membrana. El producto del gen cfaB (pp_5365) es la enzima involucrada en la síntesis de CFA en P. putida DOT-T1E y la expresión del promotor cfaB se da totalmente dependiente de el factor sigma RpoS. Si bien las enzimas cis-trans isomerasa (CTI) y la ciclopropano sintasa emplean el mismo sustrato (los dobles enlaces cis de los ácidos grasos) éstas enzimas no compiten directamente por su sustrato común. La enzima CTI que está constitutivamente presente en la célula sólo forma ácidos grasos trans en presencia de estrés y una apertura de la membrana provocada por un agente estresante que fluidifica la membrana permite que la enzima CTI accede a su sustrato localizado en la profundidad de la membranaa