Evaluación de caracteres pgpr en actinomicetos e interacciones de estas rizobacterias con hongos formadores de micorriza

Laburpena

A partir de aislados de cepas de actinomycetes nativos de suelos tropicales y de cepas de hongos formadores de micorriza arbuscular nativos de suelos tropicales, se evaluaron actividades metabólicas de los actinomycetes para su caracterización como PGPR's. Para la solubilización de fósforo, se partió de una suspensión celular en medio Picovskaya suplementado con roca fosfórica, se incubaron a 25°C y se evaluó la formación de halo de solubilización medido en mm para los 30 aislamiento de actinomycetes, expresado en términos de zonas de aclaración. Se seleccionaron 13 cepas. Posteriormente se midió la actividad enzimática mediante la técnica del p-nitrofenilfosfato (Otálora & Patiño 2003). Se seleccionaron 28 cepas con esta actividad. En cuanto a la producción de ácido indol acético se determinó por la técnica de Salkowsky (Vasanthakumar & McManus 2004), donde los actinomcyetes han sido cultivados en medio mínimo líquido, suplementado con triptófano, por 4 días, siguiendo las condiciones ya establecidas para su incubación. La determinación cuantitativa se realizó por comparación con una curva de calibración elaborada con un patrón de AIA. La producción de sideróforos se ha llevado a cabo para determinar los derivados del hidroxamato, evaluando el crecimiento en medio ST y haciendo la determinación en perclorato férrico. Adicionalmente se evaluó la interacción de los actinomycetes como biofertilizantes en plántulas de trébol, como cultivo único y en interacción con los hongos formadores de micorriza arbuscular. Las evaluaciones se han realizado mediante experimentos en invernadero. Las plántulas fueron inoculadas con suspensiones de actinomycetes de 10E6conidios/mL. El diseño experimental se basó en una metodología de bloques completos o parcelas divididas, con al menos 5 repeticiones según los tratamientos a evaluar: tratamiento con las diferentes cepas de actinomycetes, un testigo comercial y un testigo absoluto, tanto de la interacción planta - actinomycete como la de planta MA - actinomycete. La evaluación de establecimiento final de inóculo se determinó, asi como la producción y distribución de la biomasa (peso fresco y seco), el crecimiento y desarrollo radical, área foliar, absorción de nutrientes (N, P, K, Ca, Mg, Mn) por análisis del contenido foliar y disponibilidad en el suelo, mediante técnicas de análisis químico como el método de Kjendahl, técnicas húmedas y absorción atómica. Para la identificación de los aislamientos de actinomycetes se seguió la metodología propuesta por Cook & Meyers (2003), identificación a nivel de género por patrones de restricción de un segmento de la región rDNA 16S. La variedad de géneros identificados no fue tan alta, encontrando un 13,33% de Thermobifida, 70 % de Streptomyces, 3,33% de Microbispora y Kisatospora, y 6,66% de géneros que no se pudieron identificar.