Mineralización del esmalte en la fluorosis dentaria. Estudio microscópico y microanalítico

Resumen

La fluorosis dental es una malformación dentaria originada principalmente por la ingesta aguda o crónica de aguas fluoradas a altas concentraciones, aunque también existen otros factores causales como la aplicación de productos fluorados tópicos, bebidas gaseosas, dentífricos y factores genéticos. En la actualidad, es posible afirmar que la fluorosis dental es un problema endémico, ya que afecta a la población infantil y adolescente de varias zonas del mundo. La importancia de este estudio radica en que la fluorosis dental ha sido objeto de estudio por diversos autores y clásicamente se han utilizado para ello técnicas como la microscopía óptica y la MEB con electrones secundarios. Pero existe menor bibliografía registrada respecto al uso de otras técnicas empleadas en el presente trabajo y por nuestro grupo de investigación, como son el microanálisis y la microscopía electrónica de barrido con electrones retrodispersos. OBJETIVOS 1. Establecer los patrones histológicos del esmalte fluorótico en piezas procedentes de zonas endémicas mediante Microscopía Óptica (MO) y Técnicas de Desgaste y Microscopía Electrónica de Barrido (MEB) con electrones secundarios y retrodispersos. 2. Establecer patrones histoquímicos microanalíticos de mineralización en esmalte fluorótico en piezas procedentes de zonas endémicas con Microscopía Electrónica Analítica (MEA) Cuantitativa por energía dispersiva de Rayos-X. 3. Determinar la correlación de los patrones microscópicos y microanalíticos del esmalte fluorótico en piezas dentales procedentes de zonas endémicas. MATERIAL Y MÉTODOS En primer lugar, el material utilizado para este trabajo consiste en 10 dientes permanentes pertenecientes a pacientes diagnosticados de fluorosis dental, procedentes de zonas regionales endémicas, como son las localidades aledañas a la ciudad de Río IV (Argentina) y del Estado Portugués de Venezuela, donde la concentración de flúor en el agua de consumo es de 2,45 ppm. Para el grupo control se han utilizado 7 piezas dentarias permanentes, extraídas por indicación odontológica, de la ciudad de Granada (España), donde la concentración del agua de bebida era de 0.07 ppm. En relación a la metodología empleada, algunas de las piezas dentarias fueron estudiadas mediante MO. Para ello, fueron incluídas en resina epóxica autopolomerizable. A continuación, se cortaron en sentido vestíbulo-lingual en microtomo, realizando cortes de aproximadamente 140 micras de espesor. Posteriormente, las láminas dentarias obtenidas se pulieron con disco, hasta obtener espesores de aproximadamente 50 micras y se montaron en portaobjetos para su posterior obervación en Microscopio Óptico. Con independencia de las muestras utilizadas para microscopía óptica, otras láminas se utilizaron para MEB y MEA, según la siguiente pauta metodológica: En primer lugar, se realizó la técnica de criofijación de las muestras, utilizando para ello el método de enfriamiento en nitrógeno líquido. Una vez criofijadas las muestras, se procedió a su congelación y desecación mediante un instrumento de liofilización. . Después, se montaron en portamuestras de grafito. A continuación, se recubrieron con átomos de oro para las estudiadas mediante MEB y con carbón para las estudiadas mediante MEA cuantitativa por energía dispersiva de rayos X. Finalmente las muestras se observaron mediante microscopio electrónico de barrido y microscopio electrónico ambiental. Microscopía Electrónica Analítica El estudio microanalítico de fósforo y calcio en dientes diagnosticados con fluorosis, se realizó analizando tres zonas en el esmalte: Zona LF: Lesión fluorótica del esmalte Zona ZI: Zona de esmalte más próxima a la dentina Zona ZE: Zona de esmalte más próxima a la superficie externa El número de análisis realizados se llevó a cabo en 7 muestras, las cuales reunieron los requisitos idóneos para su estudio microanalítico, contabilizándose un total de 70 mediciones. El número de mediciones en las muestras control fueron, asimismo, 70. Tras la observación microscópica y a partir del empleo de una serie de constantes, se obtienen una serie de espectros de carácter cualitativo para cada una de las muestras estudiadas. Para la comparación de concentraciones medias de fósforo y calcio entre los distintos grupos de estudio se realizó un análisis estadístico.