Analisis de la diferenciacion de la troponina T en la diferenciacion celular miocárdica. Estudio bioquímico y molecular de factores moduladores

Resumen

La troponina t cardiaca es la subunidad ligada a la tropomiosina a traves de la cual el complejo troponina cardiaca esta fuertemente asociado a los filamentos de actina. Los objetivos de nuestro estudio han sido: 1.Analizar el comportamiento de la troponina t como marcador de los filamentos delgados durante el desarrollo. 2. Cuantificar los cambios de expresion de la tnt en las celulas cardiacas embrionarias de pollo. 3.Evaluar el efecto modulador que tienen las catecolaminas y determinados factores de crecimiento sobre la diferenciacion celular cardiaca y esqueletica. 4. Analisis del gen de la troponina t cardiaca en miocardiocitos de pollo tras la adicion de factores moduladores quimicos y biologicos. Hemos empleado tecnicas inmunohistoquimicas (fosfatasa alcalina), inmunobioquimicas (sds-page, western-blot) y de biologia molecular. Conclusiones: 1. La troponina t cardiaca incrementa su expresion a lo largo del desarrollo manifestandose en niveles similares en ambas camaras cardiacas. 2. La troponina t se incrementa significativamente a partir del estadio 25 hh, siendo un marcador de maduracion de los filamentos delgados. 4. La ratio citoplasma/citoesqueleto se modifica con la maduracion. 5. Los miocitos cardiacos embrionarios mantienen su viabilidad durante el cultivo. Es un modelo util para estudio de estructuras proteicas. 6. Los factores de modulacion quimica, catecolaminas inducen un incremento de la troponina t en los estadios mas avanzados del desarrollo. 7. Los factores de modulacion biologicos inducen un comportamiento inverso a los quimicos en cuanto a la acumulacion de troponina t en los miocardiocitos. 8. La troponina t se encuentra ubicada mayoritariamente en el compartimento citoesqueletico en las celulas musculares esqueleticas embrionarias. La respuesta es similar a ambos factores moduladores a la demostrada en los miocardiocitos aunque en menores porcentajes. 9. Los factores moduladores quimico