Análisis del silenciamiento génico de tcerg1 mediante exon arrays

Resumen

TCERG1 es una proteína humana muy conservada entre especies, que interacciona con factores de transcripción y splicing y que está asociada con varias enfermedades neurodegenerativas. Esta tesis doctoral ha tenido como objetivo general el estudio de la función de TCERG1 en la célula mediante el análisis del transcriptoma de células en las que silenciamos la expresión de TCERG1. En esta tesis mostramos que la merma de TCERG1 produce cambios en los niveles de transcripción de numerosos genes y que también afecta a otros genes alterando su splicing alternativo (AS, alternative splicing). Observamos que una cantidad significativa de los genes afectados por el silenciamiento de TCERG1 se encuentran preferentemente en el sistema nervioso y han sido descritos como genes relacionados con la dinámica del citoesqueleto. De acuerdo con estos datos, la merma de TCERG1 en la línea celular de neuroblastoma SH-SY5Y y en cultivos primarios derivados de hipocampo de ratón produce una reducción significativa de la longitud total de las neuritas, así como del número de ramificaciones y de la complejidad de estas. La reexpresión de TCERG1 en las células SH-SY5Y con TCERG1 silenciado rescató el fenotipo silvestre, indicando que TCERG1 afecta a la expresión de uno o varios genes cruciales para el desarrollo de las neuritas. Existen pruebas bioquímicas, neuropatológicas y genéticas de que TCERG1 tiene un papel importante en la patogénesis de la enfermedad de Huntington (HD, Huntington's disease). Actualmente se desconocen los mecanismos moleculares que están detrás de la regulación neuronal por TCERG1 y sus implicaciones en enfermedad. Esta tesis aporta por primera vez conocimientos básicos del papel funcional de TCERG1 en el sistema nervioso, los cuales podrían dar una explicación molecular a las conexiones descritas entre TCERG1 y la HD.