Autoinjertos óseos intraoralesUtilización de agentes descontaminantes e influencia sobre el osteoblasto
- Olvera Huertas, Antonio Jesús
- Candela Reyes Botella Director
- Francisco Javier Manzano Moreno Director
Defence university: Universidad de Granada
Fecha de defensa: 09 July 2021
- Olga García Martínez Chair
- María Victoria Olmedo Gaya Secretary
- Esther Muñoz Soto Committee member
- José Mario Sabio Sánchez Committee member
- Laura Ceballos García Committee member
Type: Thesis
Abstract
Objetivos. El primer objetivo de este estudio fue comparar la eficacia de dos antibióticos (amoxicilina y clindamicina) y un antiséptico (clorhexidina) en la descontaminación de injertos óseos obtenidos mediante fresado a baja velocidad. El segundo objetivo fue determinar el efecto de dos antibióticos (amoxicilina y clindamicina) y un antiséptico (clorhexidina) sobre la capacidad de crecimiento y diferenciación de los osteoblastos humanos primarios. Material y métodos. El estudio incluyó 248 muestras de tejido óseo recolectadas a partir de 62 pacientes sanos, utilizando la técnica de fresado a baja velocidad durante la colocación de implantes dentales. Cada una de las cuatro muestras obtenidas de cada paciente se vertió, utilizando un instrumento estéril, en un tubo que contenía una solución de 500 μL de 400 μg/mL de amoxicilina, 150 μg/mL de clindamicina, 0,12% de clorhexidina o solución salina fisiológica durante 1 minuto. A continuación, las soluciones de los tubos se reemplazaron con 1000 μl de medio Brain Heart Infusion (BHI) de Agar y las muestras se procesaron inmediatamente mediante incubación en una atmósfera anaeróbica o rica en CO2. El número de unidades formadoras de colonias (UFC) se determinó a las 48 h de cultivo. La proliferación de osteoblastos se determinó mediante la técnica MTT después de un minuto de tratamiento con 400 μg/mL de amoxicilina o 150 μg/mL de clindamicina o clorhexidina (0,12% o 0,2%). Se utilizó citometría de flujo para el análisis de apoptosis / necrosis. El estudio de la diferenciación celular se realizó usando un medio que promueve la mineralización y la tinción de los nódulos de calcificación formados, el cual se llevó a cabo utilizando rojo de Alzarina tras 15 y 22 días de tratamiento con 400 μg / mL de amoxicilina o 150 μg / mL de clindamicina. La actividad fosfatasa alcalina (ALP) se determinó mediante espectrofotometría después de 24 h de tratamiento. Resultados. El uso de clindamicina, amoxicilina o clorhexidina como descontaminantes durante 1 min redujo significativamente el recuento de UFC con respecto a la solución salina fisiológica (agente de control). Tanto en atmósferas anaeróbicas como ricas en CO2 se produjeron diferencias significativas en UFC/ml entre: grupos de control y clorhexidina (p <0,001), grupos de control y amoxicilina (p <0,001), grupos de control y clindamicina (p <0,001), clorhexidina y grupos de amoxicilina (p <0,0001), y grupos de clorhexidina y clindamicina (p <0,0001). No se observaron diferencias significativas entre los grupos de amoxicilina y clindamicina en atmósfera anaeróbica (p = 0,7) o rica en CO2 (p = 0,79). El tratamiento de los osteoblastos con clorhexidina al 0,12 y 0,2% durante 1 min dio lugar a una reducción significativa de la proliferación celular dependiente de la dosis (p <0,001) con un aumento significativo del porcentaje de células apoptóticas (p = 0,004 y <0,001, respectivamente). Sin embargo, la proliferación celular aumentó significativamente (p <0,05) después del tratamiento con 150 μg/mL de clindamicina. El tratamiento de los osteoblastos con 150 μg/mL de clindamicina durante 24 horas aumentó significativamente la expresión de ALP (p = 0,002). Los depósitos de calcio fueron significativamente mayores (p <0,001) en el grupo de clindamicina 150 μg/mL. Conclusiones. La clindamicina produce el mayor efecto descontaminante sobre las partículas óseas obtenidas por fresado a baja velocidad, seguida de clorhexidina y amoxicilina. Por lo tanto, puede ser una opción válida para la descontaminación rutinaria de injertos óseos intraorales. Por otra parte, la clindamicina a bajas dosis puede favorecer el crecimiento y la diferenciación de los osteoblastos. Estos dos hechos señalan a este antibiótico como descontaminante de elección para injertos óseos intraorales, frente a la clorhexidina y la amoxicilina.