Estudio de viabilidad celular en un modelo experimental de fibroblastos gingivales humanos cultivados en ausencia de suero bovino fetal
- Ximenes Oliveira, Ana Celeste
- Rodríguez, Ismael Ángel
- Garzón Bello, Ingrid
- Alaminos Mingorance, Miguel
ISSN: 0365-7965
Año de publicación: 2010
Tomo: 95
Número: 780
Páginas: 13-18
Tipo: Artículo
Otras publicaciones en: Actualidad médica
Resumen
El objetivo del estudio es aportar más informaciones metodológicas y conceptuales a cerca del efecto del SBF 10% en ensayos de viabilidad celular sobre fibroblastos gingivales humanos, con la finalidad de optimizar las condiciones experimentales para la obtención de resultados más predictivos. Se utilizarán el ensayo colorimétrico WST-1 para la evaluación de proliferación celular, el ensayo de LDH para evaluación de la integridad de membrana celular, el ensayo de cuantificación de ADN mediante espectrometría y la microscopía óptica de contraste de fases para observar las alteraciones morfológicas. Entre 6 y 24 h, las células sufren poco con la ausencia del SBF 10% y no resulta imprescindible su utilización para evaluar proliferación celular y la integridad de membranas plasmática y nuclear. Sin embargo, la morfología de las células se altera, de forma intensa, a partir de 6 h de ausencia de SBF 10%, por lo que es conveniente utilizarlo para dichos estudios morfológicos.
Referencias bibliográficas
- Abe T, Hara Y, Abe Y, Aida Y, Maeda K. Serum or growth factor deprivation induces the expression of alkaline phosphatase in human gingival fibroblasts. J Dent Res 1998 77(9):1700-1707.
- Bopp SK, Lettieri T. Comparison of four different colorimetric and fluorometric cytotoxicity assays in a zebrafish liver cell line. BMC Pharmacol 2008 8(8).
- Boraldi F, Annovi G, Paolinelli-Devincenzi C, Tiozzo R, Quaglino D. The effect of serum withdrawal on the protein profile of quiescent human dermal fibroblasts in primary cell culture. Proteomics 2008 8:66-82.
- Bortner CD, Oldenburg NBE, Cidlowski JA. The role of DNA fragmentation in apoptosis. Trends Cell Biol 1995 5:21-26.
- Brunner D, Frank J, Appl H, Schöffl H, Pfaller W, Gstraunthaler G. Serum-free cell culture: the serum-free media interactive online database. Altex 2011 27:52-62.
- Campos A. Cuerpo, histología y medicina. De la observación microscópica a la Ingeniería tisular. Discurso de ingreso en la Real Academia Nacional de Medicina y Cirurgía 2004.
- Campos A. Objetivos conceptuales y metodológicos de la investigación histológica. Educación Médica 2004 7(2):36-40.
- Carini R, Autelli R, Bellomo G, Dianzani MU, Albano E. Sodium-mediated cell swelling is associated with irreversible damage in isolated hepatocytes exposed to hypoxia or mitochondrial toxins. Biochem Biophys Res Commun 1995 206:180-185.
- Committee for Proprietary Medical Products.
- De Castro M, Orive G, Gascón AR, Hernandez RM, Pedraz JL. Evaluation of human serum albumin as a substitute of foetal bovine serum for cell culture. Int J Pharm 2006 310:8-14.
- Faria G, Celes MRN, De Rossi A, Silva LAB, Silva JS, Rossi MA. Evaluation of chlorhexidine toxicity injected in the paw of mice and added to cultured L929 fibroblasts. JOE 2007 33(6):715-722.
- Fernández-Segura E, Cañizares FJ, Cubero MA, Warley A, Campos A. Changes in elemental content during apoptotic cell death studied by electron Probe X-ray microanalysis. Exp Cell Res 1999 253:454-462.
- Flemingson, Emmadi P, Ambalavanan N, Ramakrishnan T, Vijayalakshmi R. Effect of three commercial mouth rinses on cultured human gingival fibroblast: an in vitro study. IJDR 2008 19(1):29-35.
- García del Moral R. Laboratorio de anatomía patológica. Ed Interamericana McGraw-Hill. Madrid, España 1993.
- Kulkarni GV, McCulloch AG. Serum deprivation induces apoptotic cell death in a subset of Balb/c 3T3 fibroblasts. J Cell Sci 1994 107:1169-1179.
- Leicht M, Marx G, Karbach D, Gekle M, Köhler T, Zimmer Heinz-Gerd. Mechanism of cell death of rat cardiac fibroblasts induced by serum depletion. Mol Cell Biochem 2003 251:119-126.
- Mariotti AJ, Rumpf DAH. Chlorhexidineinduced changes to human gingival fibroblast collagen and non-collagen protein production. J Perodontol 1999 70(12):1443-1448.
- Martinsson T, Haegerstrand A, Dalsgaard CarlJohan. Ropivacaine and lidocaine inhibit proliferation of nontransformed cultured adult human fibroblasts, endothelial cells and keratinocytes. Agents Actions 1993 40:78-85.
- Note for guidance on the use of bovine serum in the manufacture of human biological medical products. The European Agency for the Evaluation of Medical Products, http://www.ema.europa.eu/docs/en_GB/document_library/Scientific_guideline/2009/09/WC500003675.pdf 2003.
- Rodriguez IA, Fernández-Segura E, Ceballos G, Arrebola F, del Carmen Sánchez-Quevedo M, Campos A. Hybrid cell death induced by exposure to 2-hydroxyethyl methacrylate (HEMA): an ultrastructural and microanalytical study. J Adhes Dent 2008 10(2):105-111.
- Seravalli EP, Lear E, Cottrell JE. Cell membrane fusion by chloroprocaine. Anesth Anal 1984 63:985-990.
- Slot LA, Lauridsen AMB, Hendil KB. Intracellular protein degradation in serum-deprived human fibroblasts. Biochem J 1986 237:491-498.
- Tipton DA, Lyle B, Babich H, Dabbous MKh. In vitro cytotoxic and anti-inflammatory effects of myrrh oil on human gingival fibroblasts and epithelial cells. Toxicology in vitro 2003 17:301-310.