Estudio del sistema NADP/tiorredoxina de trigo.

Résumé

En este trabajo se ha desarrollado un estudio del sistema NADP/Tiorredoxna constituido por una Tiorredoxina H una RADPH Tiorredoxina reductosa (NTR), fundamentalmente en la semilla de trigo. Los puntos principales del estudio han sido: ... nt-family: 'Times New Roman','serif'; font-size: 12pt"> - La clonación y caracterización de dos Tiorredoxinas H y una NTR de trigo. Se han llevado a cabo la expresión y purificación de ambos componentes del sistema, ensayos in vitro de la funcionalidad del sistema y producción de anticuerpos policonales que nos han permitido la inmunodetección de la proteína. Además se ha generado un mutante de Tiorredoxina H en el sitio activo. - El estudio del patrón de expresión de los componentes del sistema en distintos órganos y tejidos del trigo. El estudio del patrón de expresión se ha llevado a cabo mediante el uso de técnicas de NORTHERN y Western Blot, RT-PCR (relativa y competitiva) e inmunolocalización en cortes de semillas de trigo, revelando una localización nuclear solo en tejidos de la semilla. -El estudio de la relación entre el estrés oxidativo y el sistema NADP/Tiorredoxina. Mediante la detección in situ de especies oxidantes se ha encontrado una localización de las Tiorredoxinas H y de radicales superóxido, tanto en el desarrollo como en la germinación.