Caracterización de productos empleados en la fabricación de medicamentos de terapias avanzadas

Resumen

En los últimos años ha habido un incremento en el desarrollo de terapias celulares para uso clínico. El suplemento del medio de cultivo celular más empleado hasta el momento ha sido el Suero Fetal Bovino (FBS). Sin embargo, su uso conlleva riesgos tales como la transmisión de patógenos bovinos, la presencia de xeno anticuerpos, así como problemas éticos y altos costes durante su obtención. El lisado plaquetario (hPL) ha demostrado ser un sustituto eficiente y seguro al FBS, empleado como suplemento del medio de cultivo de células destinadas al uso clínico, así como para la fabricación de medicamentos de terapias avanzadas. Sin embargo, aún no existe un consenso sobre su producción, lo cual conlleva una gran variabilidad entre los lotes fabricados y consecuentemente, sobre su acción biológica. Por otro lado, el uso de derivados sanguíneos requiere de la aplicación de métodos que aseguren la reducción de patógenos. Estos métodos deben ser aplicados sobre los materiales de partida o los productos finales, lo cual podría modificar la composición final y la calidad de los productos obtenidos. Los objetivos de este trabajo han sido desarrollar un método de fabricación óptimo, el establecimiento de controles y la caracterización de un lisado plaquetario humano que cumpla con los estándares de calidad establecidos por las Agencias Reguladoras como materia prima de medicamentos de terapias avanzadas. Nuestros resultados indican que el proceso de fabricación puede optimizarse evitando pasos de concentración plaquetaria, suplementando el producto con una cantidad de plasma adecuada y aplicando tres ciclos de congelación/descongelación, asegurando la calidad de los productos. La concentración de proteínas totales, albúmina, inmunoglobulinas, PDGF-AB y medidas de pH, han demostrado ser parámetros adecuados para la caracterización de las soluciones y por lo tanto, pueden ser establecidos como test de identidad. La aplicación de un sistema de reducción de patógenos basado en la combinación de riboflavina y luz ultravioleta sobre muestras de plasma y plaquetas, no afecta a la actividad biológica de los lisados plaquetarios (LP2i) a pesar de alterar su composición de forma significativa. En cuanto a los estudios de estabilidad, nuestros datos demuestran la estabilidad de las soluciones almacenadas a -20ºC (LP1) y a -20ºC y -80ºC (LP2 y LP2i) durante 24 meses. Los materiales de partida empleados (plasma y plaquetas) también se mantuvieron estables en el tiempo de almacenamiento analizado, aunque disminuyó significativamente el nivel de PDGF-AB en plaquetas almacenadas durante 13 meses. Con este trabajo de tesis concluimos que nuestro lisado plaquetario humano calidad GMP es una alternativa eficaz, que puede ser empleada de forma segura como suplemento del medio de cultivo celular o como medicamento de terapias avanzadas.