Factores inmunogenéticos y respuesta inmunológica en pacientes Covid-19

Resumen

La infección por el nuevo coronavirus SARS-CoV-2 ha generado muchas incógnitas del papel del sistema inmunitario en la patología y resolución de la infección. La COVID-19 produce un desequilibrio inmunológico caracterizado por linfopenia, así como elevación de marcadores bioquímicos de inflamación y citoquinas, pudiendo desembocar en tormenta de citoquinas y enfermedad más grave. Por otro lado, el sistema inmunitario está formado por multitud de células y proteínas que intervienen en el transcurso de una infección viral, participando tanto en la inmunidad innata como adaptativa. Todos estos factores intervienen en la evolución de la infección, siendo determinantes en la gravedad de esta. Objetivos Se buscó determinar el perfil inmunológico e inmunogenético de los pacientes COVID- 19 y su relación con la gravedad de la enfermedad: - En una primera parte se estudió y caracterizó el perfil linfocitario de pacientes con COVID-19, determinando la frecuencia de las subpoblaciones linfocitarias en pacientes hospitalizados. Además, se analizó el perfil funcional (activación y agotamiento) de estas subpoblaciones linfocitarias. Todo ello se relacionó con parámetros bioquímicos y clínicos de pacientes con distinto grado de severidad por COVID-19 - Posteriormente, nos centramos en el papel de la inmunogenética. Estudiamos los sistemas polimórficos HLA y MICA. Buscamos alelos que puedan explicar la susceptibilidad o protección frente a la infección y la gravedad de la COVID-19. - Por último, junto con el desarrollo de las vacunas para combatir la COVID-19, estudiamos la respuesta inmunitaria humoral y celular en individuos vacunados con la vacuna mRNA-1273 de Moderna. Además, analizamos el papel de las moléculas HLA de clase II en la respuesta humoral en vacunados con mRNA- 1273. Materiales y Métodos Para el estudio de las subpoblaciones linfocitarias se utilizó una población de 144 pacientes ingresados por COVID-19. Se les clasificó en función de gravedad y se realizó un análisis de subpoblaciones linfocitarias mediante citometría de flujo multiparamétrica, determinando las subpoblaciones afectadas y su estado funcional. Además, se creó una base de datos con los distintos marcadores de inflamación y de gravedad. Todos estos parámetros fueron analizados y relacionados entre sí para determinar marcadores de pronóstico. En el estudio de inmunogenética incluimos 483 pacientes de COVID-19 con distintos grados de severidad. Se realizó le tipaje de alta resolución para los alelos HLA y determinación de los alelos STR de MICA. Posteriormente comparamos las frecuencias alélicas entre los distintos grupos de gravedad y grupo control. Para finalizar, obtuvimos 601 muestras de individuos vacunados con mRNA-1273 y que no pasaron previamente la infección por SARS-CoV-2. Se determinó la respuesta humoral y celular y, se clasificaron en tres grupos en función del grado de respuesta. Por último, se seleccionaron 30 individuos de cada grupo y se les realizó el tipaje HLA de clase II. Resultados El análisis de la linfopenia mostró una disminución de las subpoblaciones linfocitarias T CD4+ y CD8+. El estudio de las subpoblaciones T helper mostró una afectación de la mayoría de ellas con una marcada disminución de linfocitos Th1, un aumento de linfocitos Th0 y bajo grado de activación linfocitaria. Los pacientes más graves presentaron mayor grado de linfopenia y neutrofilia junto a una mayor expresión de marcadores de activación y agotamiento en linfocitos T. En lo referente a la inmunogenética, los resultados del tipaje HLA no mostraron ninguna asociación con el riesgo, protección o gravedad en la infección por SARS-CoV-2. En el análisis de las moléculas MICA se determinó que el alelo MICA*A9 está asociado a infección y a enfermedad moderada. Finalmente, en el estudio de la respuesta inmunitaria en individuos vacunados con mRNA-1273, hubo una respuesta humoral general en la que destaca una gran amplitud. El estudio celular arrojó una respuesta del 86% que se relacionó positivamente con la magnitud de respuesta humoral. Por último, el alelo HLA-DRB1*07:01 y haplotipo HLADRB1* 07:01~DQA1*02:01~DQB1*02:02 se relacionaron con una respuesta humoral más intensa. Conclusiones - El mal control de la infección por SARS-CoV-2 se caracteriza por linfopenia con disminución marcada de linfocitos Th1, aumento de linfocitos Th0 y un bajo grado de activación linfocitaria. - Los alelos y haplotipos HLA no se relacionan con la susceptibilidad o gravedad en la infección por SARS-CoV-2. - El alelo MICA*A9 un factor de riesgo de infección y gravedad en la infección por SARS-CoV-2. - Hay respuesta humoral general en vacunados con mRNA-1273, similar a la observada en pacientes convaleciente de COVID-19. La respuesta celular se relaciona positivamente con el grado de respuesta humoral. - El alelo HLA-DRB1*07:01 y su haplotipo asociado, se relacionan positivamente con la generación de una respuesta humoral de más intensidad en vacunados con mRNA-1273.