Evaluación de la técnica molecular lightcycler® septifast en recién nacidos y lactantes con sospecha de sepsis

Laburpena

La sepsis neonatal es una importante causa de morbimortalidad (Pazzi y cols, 2006). Un diagnóstico precoz y el inicio rápido del tratamiento son fundamentales en la evolución del recién nacido. El hemocultivo, considerado técnica de referencia para el diagnóstico de sepsis, tiene una rentabilidad variable, ya que aparecen con frecuencia resultados falsos positivos debidos a contaminación en el momento de la toma de la muestra (Ernst, 2004) y falsos negativos debidos especialmente al limitado volumen de sangre que es posible extraer en los neonatos (Hall y cols, 1976; Jawaheer y cols, 1997), y a la antibioterapia previa a la toma (López Sastre y cols, 2008). La introducción reciente de técnicas de amplificación de ácidos nucleicos, como la PCR para la detección directa de microorganismos en sangre, ha demostrado una buena sensibilidad y especificidad, y ofrecen una mayor rapidez diagnóstica que el hemocultivo en muchos casos. (Andrade y cols, 2008) (Peters y cols, 2004). La PCR múltiple LightCycler® SeptiFast fue una de las primeras técnicas de PCR que se comercializaron, y permite detectar los 25 patógenos más frecuentemente asociados a sepsis en población adulta (Lehmann y cols, 2008). Está por determinar su utilidad real en población pediátrica, ya que en este grupo de población, especialmente en recién nacidos y lactantes, los patógenos más frecuentes pueden ser diferentes a los asociados a sepsis en adultos. Por ello, se planteó evaluar la utilidad del ensayo LightCycler® SeptiFast en recién nacidos y lactantes ingresados con sospecha de sepsis neonatal en la unidad de cuidados intensivos neonatal, comparándola con el hemocultivo tradicional. Además se analizaron los factores clínicos influyentes en el rendimiento diagnóstico de la técnica LightCycler® SeptiFast en comparación con el hemocultivo, así como la concordancia de cada técnica con el diagnóstico clínico final, y se evaluó la utilidad de un sistema automatizado de extracción de ácidos nucleicos para la investigación de patógenos en sangre mediante LightCycler® SeptiFast. Conclusiones ¿ Aunque actualmente el tiempo de manipulación requerido con la técnica molecular es superior al procesamiento de la muestra para hemocultivo, el tiempo requerido para la obtención de un resultado disminuye considerablemente. Por tanto, la técnica LightCycler SeptiFast podría ser de utilidad para mejorar el manejo del paciente con sospecha de sepsis. ¿ El empleo de sistemas automatizados de extracción de ácidos nucleicos supone una mejora en sensibilidad, reproducibilidad y una disminución considerable en el tiempo de ejecución del procedimiento molecular para el diagnóstico de sepsis. ¿ La concordancia entre LightCycler SeptiFast y el diagnóstico clínico final es superior a la obtenida entre éste y el hemocultivo. Por ello, la sensibilidad, especificidad y valores predictivos de LightCycler SeptiFast son mayores que los del hemocultivo cuando se toma el diagnóstico clínico final como método de referencia. ¿ La aparición de falsos resultados negativos debidos al tratamiento antimicrobiano tiene mayor influencia en el hemocultivo que en la técnica LightCycler SeptiFast. ¿ La técnica molecular LightCycler SeptiFast ha demostrado una tasa de contaminación por SCN muy inferior a la del hemocultivo convencional. Por ello, LightCycler SeptiFast es de utilidad tanto para descartar sepsis por SCN como para confirmar una sepsis por este microorganismo en RN, en los que habitualmente es difícil obtener hemocultivos con más de una toma. ¿ Aunque LightCycler SeptiFast es un test más caro que el hemocultivo, su uso podría suponer un ahorro al gasto ocasionado por un tratamiento antimicrobiano inadecuado y una mayor estancia hospitalaria. ¿ La técnica molecular LightCycler SeptiFast podría ser una herramienta valiosa, empleada en paralelo al hemocultivo y junto con las características clínicas y parámetros bioquímicos para el diagnóstico precoz de la sepsis neonatal. Bibliografía (1) Andrade SS, Bispo PJ, Gales AC. Advances in the microbiological diagnosis of sepsis. Shock 2008 Oct;30 Suppl 1:41-46. (2) Ernst DJ. Controlling blood-culture contamination rates. MLO Med Lab Obs 2004 Mar;36(3):14-8; quiz 20-1. (3) Hall MM, Ilstrup DM, Washington JA, 2nd. Effect of volume of blood cultured on detection of bacteremia. J Clin Microbiol 1976 Jun;3(6):643-5. (4) Jawaheer G, Neal TJ, Shaw NJ. Blood culture volume and detection of coagulase negative staphylococcal septicaemia in neonates. Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed 1997 Jan;76(1):F57-8. (5) Lehmann LE, Hunfeld KP, Emrich T, Haberhausen G, Wissing H, Hoeft A, Stuber F. A multiplex real-time PCR assay for rapid detection and differentiation of 25 bacterial and fungal pathogens from whole blood samples. Med Microbiol Immunol 2008 Sep;197(3):313-324. (6) López Sastre JB, Fernández Colomer B, Coto Cotallo GD, de la Rosa Fraile, M. Sepsis en el período neonatal. Evid Pediatr 2008 1 diciembre 2008;4:68-69-73. (7) Pazzi D, Klein J, Baker C. In: Remington JS, editor. Infectious diseases of the fetus and newborn infant. 6th ed. Philadelphia: PA: WB Saunders; 2006. p. 248-95. (8) Peters RP, van Agtmael MA, Danner SA, Savelkoul PH, Vandenbroucke-Grauls CM. New developments in the diagnosis of bloodstream infections. Lancet Infect Dis 2004 Dec;4(12):751-60.